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面粉中偶氮甲酰胺的HPLC檢測方案

偶氮甲酰胺(azodicarbonamide,ADA)是一種黃至橘紅色結晶性粉末,無臭,常用于小麥粉處理劑及焙烤食品快速發酵劑。作為面粉增筋劑,具有漂白和氧化雙重作用,在歐盟和澳大利亞,偶氮甲酰胺被禁止使用在食品工業,也有部分國家(包括中國)是允許將其作為添加劑用在食品工業中的。我國GB2760《食品添加劑使用衛生標準》(含1997~2006年增補品種)規定小麥粉中ADA最大使用量為0.045g/kg近年來,有研究表明偶氮甲酰胺在面粉中可能代謝產生氨基脲(semicarbazide,SEM)[3]。SEM通常作為呋喃西林(nitrofurazone)的代謝物在獸藥殘留中檢出。硝基呋喃類藥物具有致突變和致癌作用, 因此,面粉中偶氮甲酰胺的快速檢測方法的開發顯得尤為重要。雖然我國已規定偶氮甲酰胺在面粉中的最大使用量,但目前還未見有關于面粉中ADA快速檢測方法的報道,也無相關的檢測標準。

以下是賽智科技利用LC-10Tvp高效液相色譜儀對偶氮甲酰胺進行的HPLC檢測方案。

(本應用方案請勿轉載,侵權必究)

1、儀器與試劑

1.1儀器、設備

LC-10Tvp高效液相色譜儀

Waters Spherisorb  CNRP:250mm×4.6mm×5μm

分析天平

氮吹儀

振蕩器

針頭過濾器

微孔濾膜:0.45μm

1.2試劑

丙酮(HPLC)

正己烷(HPLC)

乙酸銨(AR)

2、供試品溶液和對照品溶液的制備

對照品溶液的制備:取標準品適量,用流動相稀釋成合適的濃度。

供試品溶液的制備:稱取1g面粉至50ml離心管中,加入10ml丙酮溶液,振蕩20min,5000r/min離心5min,吸取提取液5ml至玻璃試管中,40℃水浴下氮氣吹干。用1ml20mmol乙酸銨溶液溶解,渦旋混勻后用1ml正己烷萃取,靜置15min(有離心機條件下3000r/min離心5min)。下清液過0.45um濾膜,上機分析。

3、色譜條件

色譜柱:Waters Spherisorb  CNRP:250mm×4.6mm×5μm

流動相:20mmol乙酸銨溶液

波長:245nm

流速:0.65 mL/min

4、測定法

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5ul,注入液相色譜儀,測定,即得

5、色譜圖

6、結論

本應用方法采用標準加入法,測得加標回收率為83.1%。


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