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飼料中維生素B2的HPLC檢測方案

維生素B2又叫做核黃素,為異咯嗪衍生物,桔黃色,易被堿、光及金屬元素破壞。

核黃素是許多氧化還原酶的重要組成部分,參與能量和蛋白質代謝。動物缺乏核黃引起體代謝紊亂。其癥狀:輕則表現為生長受阻,生產力下降,嚴重者,豬發生皮炎,形成痂皮及膿腫,眼結膜、角膜炎;母畜缺乏則出現早產,胚胎死亡及胎兒畸形;雛雞的典型癥狀為足跟關節腫脹,趾內向彎曲成拳狀,急性缺乏癥能使腿部完全麻痹、癱瘓;種雞缺乏時,種蛋孵化率低,雛雞成活率低。

賽智科技參考國標(GB/T 14701-2002),利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀,經實踐檢測可提供飼料中維生素B2的HPLC檢測方案,得出的結果準確可靠,檢出限好,適用于配合飼料、濃縮飼料、復合預混合飼料、維生素預混合飼料中維生素B2的測定,方案僅供參考。

以下是高效液相色譜法對飼料中維生素B2的詳細檢測方法。

1、儀器與試劑

1.1 儀器、設備

LC-10Tvp高效液相色譜儀

Vertex 色譜柱:150mm×4.6mm×5μm;

分析天平;

恒溫水浴鍋;

針頭過濾器。

1.2 試劑

乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)

庚烷磺酸鈉

冰乙酸

三乙胺

甲醇

維生素B2標準工作液

2、試樣溶液的制備

稱取維生素預混合飼料0.25g-0.5g,于100ml棕色容量瓶中,加入三分之二的提取液于80-100℃水浴中煮沸30min,待冷卻后加入14ml甲醇,用提取液定容至刻度,混勻,過濾。維生素預混合飼料樣液需有提取液進一步5倍-10倍,取部分過濾液過0.45μm濾膜過濾,高效液相色譜儀分析。

3、色譜條件

色譜柱:Vertex 色譜柱 150mm×4.6mm×5μm;

流速:1.0mL/min;

溫度:室溫;

進樣量:20μL;

檢測波長:單檢維生素B2為267nm,多種維生素聯檢為280nm。

流動相:在已裝入700ml去離子水的1000ml容量瓶中,加入50mgEDTA、1.1g庚烷磺酸鈉,待全溶解后,加入25ml冰乙酸、5ml三乙胺,用去離子水定容至刻度搖勻。用冰乙酸、三乙胺調解pH至3.4±0.02,過0.45μm濾膜,取該溶液860ml與140ml甲醇混合,超聲脫氣,待用。

4、色譜圖

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