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自1月25日新西蘭牛奶中發(fā)現(xiàn)了有害物質(zhì)（雙氰胺）被曝光后，賽智科技一直關(guān)注事件發(fā)展，并積極安排對奶制品中雙氰胺的高效液相色譜（HPLC)檢測方案的實(shí)驗(yàn)。

雙氰胺又名二氰二胺，縮寫DICY或DCD。雖然國際標(biāo)準(zhǔn)未對食品中的雙氰胺限量，但高劑量的雙氰胺對人體是有毒的。

經(jīng)實(shí)踐檢驗(yàn)，賽智科技全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀，可以準(zhǔn)確檢驗(yàn)?zāi)讨破分须p氰胺的含量，方案僅供參考。

1、儀器與試劑

1.1 儀器

LC-10Tvp高效液相色譜儀

渦旋振蕩器

超聲波清洗機(jī)

氮吹儀

新一代雙氰胺凈化管

Venusil? HILIC液相色譜柱

微孔濾膜

1.2 試劑

雙氰胺標(biāo)準(zhǔn)品（CAS： 461-58-5；FW=84.08）

乙酸銨、乙酸、乙腈為色譜純

實(shí)驗(yàn)用水為超純水

2、色譜條件(高效液相色譜HPLC法)

色譜柱：Venusil? HILIC（5μm，100?，4.6*250mm）

流動(dòng)相： 10mmol/L乙酸銨（pH=4.0），乙腈=15: 85；

波長：220nm

進(jìn)樣量：10μl

柱溫：30℃

流速：0.8mL/min

3、測定原理

樣品加水溶解，加乙腈超聲提取，離心渦旋，經(jīng)高效液相色譜儀測試 ，外標(biāo)法定量。

4、實(shí)驗(yàn)步驟

稱取1g試樣于50mL具塞離心管中，加2mL水，渦旋30s，加2ml乙腈渦旋30s。再往現(xiàn)有的提取液中加2mL乙腈，重復(fù)上述提取步驟。再將該提取步驟重復(fù)2次，得到共計(jì)約10mL的提取液。以4000r/min離心5min，將全部上清液加入新一代雙氰胺凈化管中（500mg/15mL），將MAS管上下晃動(dòng)30s，然后渦旋30s，8000r/min離心5min，取全部上清液（約10ml）于玻璃試管中，50℃下氮?dú)獯蹈桑尤?ml乙腈復(fù)溶，過0.22μm微孔濾膜，待測。

注：1. 做基質(zhì)加標(biāo)實(shí)驗(yàn)時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)溶液建議選擇以水為溶劑，防止加標(biāo)瞬間發(fā)生蛋白沉淀；

2. 乙腈提取分4次，為防止乙腈體積過多時(shí)沉淀蛋白速度過快，影響提取效果。

5、色圖譜